Třetí pohlaví je souhrnné označení pro pohlaví a gendery, které nelze identifikovat jako mužské či ženské.
Týká se především intersexuálů, kteří nesou biologické ženské a mužské pohlavní znaky, a lidí s nebinární genderovou identitou.
Termín se také používá pro společenské skupiny tradičně spojené s nebinárním pohlavím/genderem v různých kulturách, například pro indické hidžry a berdaše mezi domorodými Američany, nebo v souvislosti s historickými zprávami o osobách které nezapadaly do genderové binarity, jako byli skytští Enarové nebo egyptští sekhet.
Jako třetí pohlaví byli taky někdy chápáni homosexuální lidé.
Nápisy na keramice z egyptského Luxoru vzniklé v době střední říše zmiňují tři pohlaví či gendery: muže, ženu a sht/sechet.
Hidžrové v Indii, Pákistánu, Bangladéši a Nepálu jsou zpravidla biologičtí muži, kteří se ale identifikují jako ženy, část hidžrů jsou intersexuálové.
Bugisové na indonéském ostrově Sulawesi rozlišují kromě muž a ženy ještě tři další pohlaví.
Muxe v Mexiku, především v Oaxace s výrazným vlivem zapotécké kultury, jsou biologičtí muži, kteří přijímají ženskou roli.
Sekrata, mezi Sakalavy na Madagaskaru, jsou biologičtí muži, kteří vykazují v dětství chování chápané jako ženské a vychovaní proto jako dívky.
Berdašové, v angličtině „two-spirit“, jsou domorodí Američané vymykající tradičním západním genderovým a sexuálním normám.
Bakla jsou na Filipínách biologičtí muži, kteří se oblékají a chovají jako ženy.
V židovské Mišně a Talmudu se objevuje šest pohlaví či genderů: muž, žena, saris – muž, kterému chybí některé mužské pohlavní znaky, zpravidla eunuch, ailonit – žena, které chybí některé ženské pohlaví znaky, androginos – jedinec mající znaky obou pohlaví, androgyn, a tumtum – jedinec, jehož pohlavní znaky jsou skryté.
Německo uznává od roku 2013 třetí pohlaví nebo „pohlaví nula“, které je určeno především pro intersexuály.
Indie, Bangladéš a Nepál uznávají třetí pohlaví od roku 2014.
Rakousko umožňuje v úředních dokumentech od roku 2018 uvádět i jiné pohlaví než ženské, například „inter“ (mezi), „divers“ (jiné) či „nejednoznačné“.